جداسازی و شناسایی استافیلوکوکوس اورئوس‌های انتروتوکسوژنیک تایپ A به ‌وسیله‌ی Multiplex PCR

Authors

  • بهمنی, میرزاخلیل
  • سعادتی, مجتبی
Abstract:

مقدمه. استافیلوکوکوس اورئوس سموم پروتئینی و فاکتورهای بیماریزایی خارج سلولی مختلفی تولید می‌کند. یکی از مهمترین پروتئین‌های خارج سلولی، انتروتوکسین می‌باشد که عامل ایجاد مسمومیت غذایی به وسیله‌ی این گونه از باکتری است. این توکسین‌ها از دستگاه گوارش به دستگاه گردش خون وارد ‌شده، سپس مرکز عصبی غیرارادی استفراغ را تحریک کرده، باعث ایجاد حالت تهوع، استفراغ، دل‌پیچه و اسهال می‌شود که می‌تواند باعث کم آب شدن بدن گردد. روش‌های مستقیم متعددی برای شناسایی انتروتوکسین‌ها وجود دارد (الایزا، روش‌های ایمنی اگلوتیناسیون لاتکس و ...)، اما با روش‌های تکثیر DNA [واکنش‌های زنجیره‌ای پلیمراز ) mouseover=""function" onmouseout=""function" href="%22#_msocom_1"" name=""_msoanchor_1"">[-1] (PCR ] می‌توان حضور سویه‌های استافیلوکوکوس اورئوس انتروتوکسوژنیک را قبل از بیان انتروتوکسین و بر اساس توالی اختصاصی ژن نشان داد. مواد و روش‌ کار. در این مطالعه سویه‌های استافیلوکوکوس اورئوس جداسازی شده از نمونه‌های بیماران، ناقلین سالم و محیطی با آزمایش‌های بیوشیمیایی شناسایی شدند. سپس نسبت به طراحی پرایمرهای مورد نظر اقدام و در واکنش PCR ، ژن‌ انتروتوکسین استافیلوکوکی تایپ A ( sea ) و ژن نوکلئاز استافیلوکوکی ( nuc ) تکثیر گردید. قطعات تکثیر یافته DNA برای ژن نوکلئاز استافیلوکوکی، 279جفت باز و برای ژن انتروتوکسین استافیلوکوکی تایپ A ، 552 جفت ‌باز بود که ‌توسط هضم آنزیمی مورد تأیید قرار گرفت. باکتری استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس به عنوان کنترل منفی در این واکنش مورد استفاده قرار گرفت که فاقد هرگونه محصول در واکنش PCR بود.  نتایج. در این تحقیق 98 سویه مورد بررسی قرار گرفتند که 89 سویه جداسازی شده با استفاده از واکنش Multiplex PCR به عنوان استافیلوکوکوس اورئوس مورد تأیید قرار گرفته، وجود ژن انتروتوکسین مورد ارزیابی قرار گرفت. شش سویه (%74/6) از استافیلوکوکوس اورئوس جدا شده، واجد ژن انتروتوکسین تایپ A بودند. نه سویه ‌ ی جداسازی شده (%18/9) که در آزمایش‌های بیوشیمیایی به عنوان استافیلوکوکوس اورئوس شناسایی شده بودند در بررسی مولکولی مورد تأیید واقع نشدند. بحث. این روش سریع، حساس، اختصاصی، ارزان و متفاوت نسبت به سنجش‌های مرسوم بیوشیمیایی و سرولوژیکی بوده، قادر است عامل تولید کننده ی انتروتوکسین استافیلوکوکی تایپ ‌ A را شناسایی نماید. 

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

جداسازی و شناسایی استافیلوکوکوس اورئوس های انتروتوکسوژنیک تایپ a به وسیله ی multiplex pcr

[-1] (pcr ] می توان حضور سویه های استافیلوکوکوس اورئوس انتروتوکسوژنیک را قبل از بیان انتروتوکسین و بر اساس توالی اختصاصی ژن نشان داد. مواد و روش  کار. در این مطالعه سویه های استافیلوکوکوس اورئوس جداسازی شده از نمونه های بیماران، ناقلین سالم و محیطی با آزمایش های بیوشیمیایی شناسایی شدند. سپس نسبت به طراحی پرایمرهای مورد نظر اقدام و در واکنش pcr ، ژن انتروتوکسین استافیلوکوکی تایپ a ( sea ) و ژن ن...

full text

شناسایی ژن های انتروتوکسین استافیلوکوکوس اورئوس با استفاده Multiplex PCR

سابقه و هدف: استافیلوکوکوس اورئوس یکی از مهمترین عوامل مسمومیت غذایی در جهان می باشد. در تحقیقات مختلف مشخص گردیده است که 18-15 درصد سویه های استافیلوکوکوس که از منابع مختلف جدا می شود قادر به تولید انتروتوکسین می باشند که فاکتور اصلی مسمومیت می باشند. هدف از تحقیق حاضر شناسایی ژنهای انتروتوکسین نظیر: (femA،see ،sed ،sec ،seg ،seb، sea) در استافیلوکوکوس اورئوس که با استفاده از روش PCR چندگانه ا...

full text

جداسازی، شناسایی و تعیین هویت مولکولی گونه‌‌‌های کریپتوسپوریدیوم در اسهال گوساله‌‌‌ها به روش multiplex nested-PCR

زمینه مطالعه: تشخیص گونه­های کریپتوسپوریدیوم براساس خصوصیات مورفولوژی بسیار محدود بوده و به تنهایی فاقد ارزش تاکسونومیک است، و لذا استفاده از روش­های مولکولی این محدودیت­ها را تا حدودی برطرف می­سازد. هدف: هدف از این مطالعه تعیین ژنوتیپ­های غالب کریپتوسپوریدیوم در گوساله­های مبتلا به اسهال بود. روش کار: مطالعه در گوساله‌های کمتر از 3 ماه و برای مدت 2 سال انجام شد. در طول دوره مطالعه، 160 نمونه م...

full text

شناسایی باکتری استافیلوکوکوس اورئوس تولید کننده انتروتوکسین تایپ C از نمونه های ناقلین سالم به وسیله PCR

زمینه و هدف: استافیلوکوکوس اورئوس یک پاتوژن است که در شرایط مساعد می تواند با رشد در مواد غذایی و تولید انتروتوکسین سبب مسمومیت غذایی در انسان شود. تنها برخی از سویه های استافیلوکوکوس اورئوس توانایی تولید انتروتوکسین و ایجاد مسمومیت غذایی را دارند که با استفاده از روش های تکثیر DNA می توان حضور سویه های استافیلوکوکوس اورئوس انتروتوکسوژنیک را بر اساس توالی اختصاصی ژن شناسایی نمود. لذا این پژوهش ...

full text

شناسایی ژن های انتروتوکسین استافیلوکوکوس اورئوس با استفاده multiplex pcr

سابقه و هدف: استافیلوکوکوس اورئوس یکی از مهمترین عوامل مسمومیت غذایی در جهان می باشد. در تحقیقات مختلف مشخص گردیده است که 18-15 درصد سویه های استافیلوکوکوس که از منابع مختلف جدا می شود قادر به تولید انتروتوکسین می باشند که فاکتور اصلی مسمومیت می باشند. هدف از تحقیق حاضر شناسایی ژنهای انتروتوکسین نظیر: (fema،see ،sed ،sec ،seg ،seb، sea) در استافیلوکوکوس اورئوس که با استفاده از روش pcr چندگانه ا...

full text

شناسایی سریع clostridium perfringens تایپ هایa، b،c، d به روش multiplex pcr

clostridium perfringens بخشی از فلور طبیعی خاک می باشد و گزارشات متعددی از جدا شدن این ارگانیسم از مواد غذایی خام و پخته وجود دارد. این باکتری به پنج تایپ a تا e تقسیم شده است و این تقسیم بندی بر اساس تولید سم آلفا، بتا، اپسیلون و یوتا می باشد. در این مطالعه از واکنش multiplex pcr جهت شناسایی باکتری cl. perfringens تایپ هایa, b,c, d استفاده شد. تائید اولیه تیپ های باکتریایی مورد استفاده با روش ...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 8  issue 2

pages  119- 128

publication date 2006-07

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Keywords

No Keywords

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023